一种鼠用莪术醇饵剂及其制备方法

  (74)专利代理机构沈阳工匠智诚知识产权代理事务所(普通合伙)21256专利代理师孙楠

  本发明涉及药物领域,特别涉及一种鼠用莪术醇饵剂及其制备方法,由以下组分组成,莪术醇、环糊精衍生物、棉籽粉、鲜奶粉、蛋白糖、玉米粉、大豆粉和卵清蛋白,利用β‑环糊精与磷酸发生酯化反应,成功的将磷酸酯基团引入β‑环糊精中形成环糊精衍生物,使得制备的环糊精衍生物与细胞膜的磷脂双分子层间具有较好的相容性,更利于细胞的吸收且药剂对种群密度的控制作用跟着时间的推移效果在增加,药剂的持续效果较长。

  1.一种鼠用莪术醇饵剂,其特征是,由以下组分按重量份制备而成,莪术醇6‑12份、环糊精衍生物6‑12份、棉籽粉5‑10份、鲜奶粉2‑6份、蛋白糖2‑4份、玉米粉25‑30份、大豆粉25‑35份和卵清蛋白3‑8份,

  所述环糊精衍生物的制备方法为,在乙二胺中加入β‑环糊精,在搅拌状态下加入钛酸四丁酯,并向其中添加磷酸,升高温度,恒温条件下反应,反应结束后减压蒸馏,得到油状物,即为环糊精衍生物,

  2.根据权利要求1所述的一种鼠用莪术醇饵剂,其特征是,所述环糊精衍生物制备过程中升高温度至90‑110℃,反应时间为6‑8h。

  3.根据权利要求1‑2任一项所述的一种鼠用莪术醇饵剂的制备方法,其特征是,包括如下步骤,

  S1、在水溶液中加入环糊精衍生物,升高温度至30‑40℃,并向其中加入莪术醇和棉籽粉,恒温搅拌1‑2h,得到混合液,

  S2、室温下,在步骤S1得到的混合液中依次加入鲜奶粉、蛋白糖、卵清蛋白,均匀搅拌后,再向其中加入玉米粉和大豆粉,混合均匀,

  S3、将混合好的原料放入制粒机内,启动制粒机将混合原料制备成颗粒状,自然冷却后成型,

  4.根据权利要求3所述的一种鼠用莪术醇饵剂的制备方法,其特征是,在步骤S1中,莪术醇的添加方法为,将莪术醇平均分为3份,每次添加时间间隔20min。

  5.根据权利要求3所述的一种鼠用莪术醇饵剂的制备方法,其特征是,在步骤S2中,在混合过程中,采用超声波的方式,使原料混合的更为均匀。

  6.根据权利要求3所述的一种鼠用莪术醇饵剂的制备方法,其特征是,在步骤S4中,干燥器的干燥温度为110‑120℃。

  [0001]本发明涉及药物领域,具体涉及一种鼠用莪术醇饵剂及其制备方法。

  [0002]鼠类属于小型啮齿动物,具有适应能力强、性周期短、繁殖率快等特点。它们破坏农田粮食、森林树木、草原牧草,因造成巨大经济损失,而每年需要国家财政大量拨款进行鼠害治理。

  [0003]传统的灭鼠方法是利用化学灭鼠剂杀死鼠类个体,短时间内老鼠数量虽然会急速下降,可是很快又会迅速的增加。国内外动物学家考证过“残存鼠会迅速配对繁殖,数量很快回升,如果100只鼠被毒死90只,那么剩下的10只可很快的重新配对,因为腾出了地盘和食物,剩下的繁殖更快”。另外化学灭鼠剂危及人、牲畜、禽类、鸟类、天敌等非靶动物的生命安全,会对生态环境能够造成严重的损害。彻底降低老鼠的种群数量,对老鼠进行不育避孕是目前国际上一种很好的选择。

  [0004]申请号为8.0的中国专利公开了一种鼠类不育剂的环糊精包合物及其制备方法,将鼠类不育剂与环糊精或其衍生物的质量比为1(1)200混合,制成包合物,所得的包合物不但拥有非常良好的水溶性,而且具有非常好的紫外稳定性,适合田间投药的要求。

  [0005]申请号为5.X的中国专利公开了一种莪术醇的提取方法,以其作为主要活性成分的鼠用抗生育药物,通过将莪术粉碎后常压下用水蒸气蒸馏,分离得莪术油,真空条件下进一步精馏,除去低沸点的物质,冷却过滤、结晶最终得到莪术醇,与棉籽粉、麦麸、豆粕等混合造粒成型得到鼠用抗生育药物,制备工艺简单,适合工业化生产,适口性强,环境友好。

  [0006]但上述技术中药物吸收率较低,因此就需要进一步提高药物的吸收情况。

  [0007]未解决以上问题,本发明制备了一种鼠用莪术醇饵剂及其制备方法,以乙二胺作溶剂,钛酸四丁酯作催化剂,在一定温度下令β‑环糊精与磷酸发生酯化反应得到环糊精衍生物,实现了对β‑环糊精的修饰,有效的提高了药物的吸收效果。

  [0009]一种鼠用莪术醇饵剂,由以下组分按重量份制备而成,莪术醇6‑12份、环糊精衍生物6‑12份、棉籽粉5‑10份、鲜奶粉2‑6份、蛋白糖2‑4份、玉米粉25‑30份、大豆粉25‑35份和卵清蛋白3‑8份,

  [0010]所述环糊精衍生物的制备方法为,在乙二胺中加入β‑环糊精,在搅拌状态下加入钛酸四丁酯,并向其中添加磷酸,升高温度,恒温条件下反应,反应结束后减压蒸馏,得到油状物,即为环糊精衍生物。

  [0012]1.利用β‑环糊精与磷酸发生酯化反应,成功的将磷酸酯基团引入β‑环糊精中形成

  环糊精衍生物,该环糊精衍生物由于其独特的中空圆通立体环状结构,其疏水性的空洞内可嵌入莪术醇化合物,与其形成包接复合物起到增溶作用,

  [0013]2.制备的环糊精衍生物上含有磷酸酯基团,而磷脂双分子层是构成细胞膜的基本支架,使得制备的环糊精衍生物与细胞膜的磷脂双分子层间具有较好的相容性,更利于细胞的吸收,

  [0014]3.本发明制备的鼠用莪术醇饵剂其药剂对种群密度的控制作用跟着时间的推移效果在增加,药剂的持续效果较长。

  [0015]下面将结合本申请实施例,对本申请实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本申请一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本申请中的实施例,本领域普通技术人员在没做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本申请保护的范围。

  [0017]一种鼠用莪术醇饵剂,由以下组分按重量份制备而成,莪术醇6份、环糊精衍生物6份、棉籽粉5份、鲜奶粉2份、蛋白糖2份、玉米粉25份、大豆粉25份和卵清蛋白3份。

  [0018] 其中,环糊精衍生物的制备方法为,在15重量份乙二胺中加入12重量份β‑环糊精,在搅拌状态下加入4重量份钛酸四丁酯,并向其中添加12重量份磷酸,磷酸分多次少量添加,升高温度至90℃,保持温度在90℃,恒温条件下反应6h,反应结束后减压蒸馏,得到油状物,即为环糊精衍生物,反应过程如下,

  [0021] S1、在50重量份水溶液中加入6重量份环糊精衍生物,升高温度至30℃,并向其中加入6重量份莪术醇和5重量份棉籽粉,恒温搅拌1h,得到混合液,其中,莪术醇的添加方法为,将6重量份莪术醇平均分为3份,每次添加2重量份,每次添加完成后间隔20min后再进行下一次添加,

  [0022] S2、冷却至室温,室温下,在步骤S1得到的混合液中依次加入2重量份鲜奶粉、2重量份蛋白糖、3重量份卵清蛋白,均匀搅拌后,再向其中加入25重量份玉米粉和25重量份大豆粉,混合均匀,在混合过程中,采用超声波的方式,在搅拌状态下加入超声波,有利于原料的破碎,使其混合的更为均匀,

  [0023] S3、将混合好的原料放入制粒机内,启动制粒机将混合原料制备成颗粒状,室温条件下,自然冷却后成型,

  [0024] S4、将颗粒原料输送至干燥器进行干燥,干燥温度为110℃,除去原料中多余的水分,即得。

  [0026] 本实施例与实施例1相比,原料配比不同,环糊精衍生物制备条件不同,鼠用莪术醇饵剂的制备条件不同,其余条件不变,具体为,

  [0027] 一种鼠用莪术醇饵剂,由以下组分按重量份制备而成,莪术醇12份、环糊精衍生物12份、棉籽粉10份、鲜奶粉6份、蛋白糖4份、玉米粉30份、大豆粉35份和卵清蛋白8份。

  [0028] 其中,环糊精衍生物的制备方法为,在20重量份乙二胺中加入18重量份β‑环糊精,在搅拌状态下加入6重量份钛酸四丁酯,并向其中添加16重量份磷酸,磷酸分多次少量添加,升高温度至110℃,保持温度在110℃,恒温条件下反应8h,反应结束后减压蒸馏,得到油状物,即为环糊精衍生物。

  [0030] S1、在80重量份水溶液中加入12重量份环糊精衍生物,升高温度至40℃,并向其中加入12重量份莪术醇和10重量份棉籽粉,恒温搅拌2h,得到混合液,其中,莪术醇的添加方法为,将12重量份莪术醇平均分为3份,每次添加4重量份,每次添加完成后间隔20min后再进行下一次添加,

  [0031] S2、冷却至室温,室温下,在步骤S1得到的混合液中依次加入6重量份鲜奶粉、4重量份蛋白糖、8重量份卵清蛋白,均匀搅拌后,再向其中加入30重量份玉米粉和35重量份大豆粉,混合均匀,在混合过程中,采用超声波的方式,在搅拌状态下加入超声波,有利于原料的破碎,使其混合的更为均匀,

  [0032] S3、将混合好的原料放入制粒机内,启动制粒机将混合原料制备成颗粒状,室温条件下,自然冷却后成型,

  [0033] S4、将颗粒原料输送至干燥器进行干燥,干燥温度为120℃,除去原料中多余的水分,即得。

  [0035] 本实施例与实施例1相比,原料配比不同,环糊精衍生物制备条件不同,鼠用莪术醇饵剂的制备条件不同,其余条件不变,具体为,

  [0036] 一种鼠用莪术醇饵剂,由以下组分按重量份制备而成,莪术醇9份、环糊精衍生物10份、棉籽粉8份、鲜奶粉4份、蛋白糖3份、玉米粉28份、大豆粉30份和卵清蛋白5份。

  [0037] 其中,环糊精衍生物的制备方法为,在18重量份乙二胺中加入16重量份β‑环糊精,在搅拌状态下加入4重量份钛酸四丁酯,并向其中添加14重量份磷酸,磷酸分多次少量添加,升高温度至100℃,保持温度在100℃,恒温条件下反应8h,反应结束后减压蒸馏,得到油状物,即为环糊精衍生物。

  [0039] S1、在60重量份水溶液中加入10重量份环糊精衍生物,升高温度至40℃,并向其中加入9重量份莪术醇和8重量份棉籽粉,恒温搅拌2h,得到混合液,其中,莪术醇的添加方法为,将9重量份莪术醇平均分为3份,每次添加3重量份,每次添加完成后间隔20min后再进行

  [0040] S2、冷却至室温,室温下,在步骤S1得到的混合液中依次加入4重量份鲜奶粉、3重量份蛋白糖、5重量份卵清蛋白,均匀搅拌后,再向其中加入28重量份玉米粉和30重量份大豆粉,混合均匀,在混合过程中,采用超声波的方式,在搅拌状态下加入超声波,有利于原料的破碎,使其混合的更为均匀,

  [0041] S3、将混合好的原料放入制粒机内,启动制粒机将混合原料制备成颗粒状,室温条件下,自然冷却后成型,

  [0042] S4、将颗粒原料输送至干燥器进行干燥,干燥温度为110℃,除去原料中多余的水分,即得。

  [0044] 本对比例与实施例3相比,在原料中将环糊精衍生物替换为β‑环糊精,其余条件不变,具体为,

  [0045] 一种鼠用莪术醇饵剂,由以下组分按重量份制备而成,莪术醇9份、β‑环糊精10份、棉籽粉8份、鲜奶粉4份、蛋白糖3份、玉米粉28份、大豆粉30份和卵清蛋白5份。

  [0047] S1、在60重量份水溶液中加入10重量份β‑环糊精,升高温度至40℃,并向其中加入9重量份莪术醇和8重量份棉籽粉,恒温搅拌2h,得到混合液,其中,莪术醇的添加方法为,将9重量份莪术醇平均分为3份,每次添加3重量份,每次添加完成后间隔20min后再进行下一次添加,

  [0048] S2、冷却至室温,室温下,在步骤S1得到的混合液中依次加入4重量份鲜奶粉、3重量份蛋白糖、5重量份卵清蛋白,均匀搅拌后,再向其中加入28重量份玉米粉和30重量份大豆粉,混合均匀,在混合过程中,采用超声波的方式,在搅拌状态下加入超声波,有利于原料的破碎,使其混合的更为均匀,

  [0049] S3、将混合好的原料放入制粒机内,启动制粒机将混合原料制备成颗粒状,室温条件下,自然冷却后成型,

  [0050] S4、将颗粒原料输送至干燥器进行干燥,干燥温度为110℃,除去原料中多余的水分,即得。

  [0052] 本对比例与实施例3相比,在原料中不加入环糊精衍生物,其余条件不变,具体为,

  [0053] 一种鼠用莪术醇饵剂,由以下组分按重量份制备而成,莪术醇9份、棉籽粉8份、鲜奶粉4份、蛋白糖3份、玉米粉28份、大豆粉30份和卵清蛋白5份。

  [0055] S1、在60重量份水溶液中加入9重量份莪术醇和8重量份棉籽粉,升高温度至40℃,恒温搅拌2h,得到混合液,其中莪术醇的添加方法为,将9重量份莪术醇平均分为3份,每次添加3重量份,每次添加完成后间隔20min后再进行下一次添加,

  [0056] S2、冷却至室温,室温下,在步骤S1得到的混合液中依次加入4重量份鲜奶粉、3重量份蛋白糖、5重量份卵清蛋白,均匀搅拌后,再向其中加入28重量份玉米粉和30重量份大豆粉,混合均匀,在混合过程中,采用超声波的方式,在搅拌状态下加入超声波,有利于原料的破碎,使其混合的更为均匀,

  [0057] S3、将混合好的原料放入制粒机内,启动制粒机将混合原料制备成颗粒状,室温条件下,自然冷却后成型,

  [0058] S4、将颗粒原料输送至干燥器进行干燥,干燥温度为110℃,除去原料中多余的水分,即得。

  [0060] 本对比例与实施例3相比,环糊精衍生物制备方法不同,其余条件不变,具体为,

  [0061] 一种鼠用莪术醇饵剂,由以下组分按重量份制备而成,莪术醇9份、环糊精衍生物10份、棉籽粉8份、鲜奶粉4份、蛋白糖3份、玉米粉28份、大豆粉30份和卵清蛋白5份。

  [0062] 其中,环糊精衍生物的制备方法为,在18重量份乙二胺中加入16重量份β‑环糊精,在搅拌状态下加入4重量份钛酸四丁酯,并向其中添加15重量份乙二酸,乙二酸分多次少量添加,升高温度至100℃,保持温度在100℃,恒温条件下反应8h,反应结束后减压蒸馏,得到油状物,即为环糊精衍生物。

  [0064] S1、在60重量份水溶液中加入10重量份环糊精衍生物,升高温度至40℃,并向其中加入9重量份莪术醇和8重量份棉籽粉,恒温搅拌2h,得到混合液,其中,莪术醇的添加方法为,将9重量份莪术醇平均分为3份,每次添加3重量份,每次添加完成后间隔20min后再进行下一次添加,

  [0065] S2、冷却至室温,室温下,在步骤S1得到的混合液中依次加入4重量份鲜奶粉、3重量份蛋白糖、5重量份卵清蛋白,均匀搅拌后,再向其中加入28重量份玉米粉和30重量份大豆粉,混合均匀,在混合过程中,采用超声波的方式,在搅拌状态下加入超声波,有利于原料的破碎,使其混合的更为均匀,

  [0066] S3、将混合好的原料放入制粒机内,启动制粒机将混合原料制备成颗粒状,室温条件下,自然冷却后成型,

  [0067] S4、将颗粒原料输送至干燥器进行干燥,干燥温度为110℃,除去原料中多余的水分,即得。

  [0070] 采用肠囊翻转法。选取健康的SD大鼠,实验前禁食24h(自由饮水) 。用20,的乌拉坦腹腔注射麻醉,沿腹中线打开腹腔,取出实验的小肠段。将取出的小肠立即置于预热37℃的Krebs液中,用Krebs液冲洗小肠表面,并仔细清除浆膜层外面的脂肪组织。剪取大约5cm 的一段小肠,用手术线结扎肠段一端,用圆头细玻璃棒将肠段翻转,使粘膜层在外,浆膜层在内,洗净内容物。用手术线结扎肠段另一端,肠囊内注入1 .0mL Krebs液,滤纸吸干表面,立即放入含有本发明实施例1‑3及对比例1‑3中鼠用莪术醇饵剂的制备方法中步骤S1所得的混合液的Krebs液的小试管中,持续通入氧气,置于37℃水浴中孵育,每个样品平行操作三份。1 .5h后,取出肠囊中的200μL肠液于5mLEP管中,加入内标液20μL(300μg/mL)和3mL叔丁基甲醚,涡旋混合5min, 1000rpm离心15min。取上清1mL,氮气吹干,加入100μL甲醇复溶。用RP‑HPLC法测定药物的含量,计算吸收百分数。结果如表1所示,色谱条件如下,Diamobsil ODS C18色谱柱,250×4.6mm,5μm,流动相,乙腈,水(2)1 ,流速, 1mL/min,柱温,30℃,检测波长(227nm)进样量20μL。

  [0073] 由上表能够准确的看出,实施例1‑3的吸收百分数高于对比例1‑3的吸收百分数,对比例1和吸收百分数要高于对比例2的吸收百分数,尤其地实施例3的吸收百分数是对比例2的3.5倍,以上结果说明经本实施例1‑3改性后的药物的吸收性得到了进一步的提高,进一步对比实施例3和对比例3发现,在环糊精衍生物的制备过程中,利用乙二酸改性β‑环糊精后其药物的吸收效果要低于磷酸改性后药物的吸收效果,是因为磷酸改性β‑环糊精后得到的环糊精衍生物上含有磷酸酯基团,与细胞膜的磷脂双分子层之间拥有非常良好的相容性。

  [0076] 青海省海北州海晏县甘子河乡德州村的夏秋草场,位于海北藏族自治州西海镇周边的金银滩草原。

  [0080] 3月中旬以10×10m距离布放1袋(50g) 。本实施例3制备的鼠用莪术醇饵剂拌燕麦饵粒,在鼠每个洞口15‑20cm处投放,投饵量15‑20粒。

  [0082] 2020年和2021年3月、4月、5月中旬对实验区,对照区进行了三次调查。

  [0086] 由上表能得出, (1)鼠用莪术醇母粉拌燕麦粒试验区的鼠类控制效果比饵剂试

  验区的控制效果更为显著,分析其问题大多是因为莪术醇饵剂与燕麦混合后饵粒适口性较好,鼠类采食药剂量多的原因。 (2)经调查发现当年的效果不及第二年明显,分析其问题大多是,由于受繁殖期时间的影响,在投药期间试验区可能有少量害鼠已受孕,故害鼠在后期采食药剂效果不明显,所以当年的效果不及第二年显著。 (3)经调查表明,2020年施药,2021年未施药,试验药剂对种群密度的控制作用跟着时间的推移效果在增加,也说明药剂的持续效果1‑2年或许更长。

  [0087] 在本发明中,以乙二胺作溶剂,钛酸四丁酯作催化剂,在一定温度下令β‑环糊精与磷酸发生酯化反应得到环糊精衍生物,实现了对β‑环糊精的修饰,β‑环糊精分子为略呈锥形的中空圆筒立体环状结构,其下端含有羟基具有亲水性,其空腔内由于受到C‑H键的屏蔽作用形成了疏水区,在本发明中,利用β‑环糊精与磷酸发生酯化反应,成功的将磷酸酯基团引入β‑环糊精中形成环糊精衍生物,该环糊精衍生物由于其独特的中空圆通立体环状结构,其疏水性的空洞内可嵌入莪术醇化合物,与其形成包接复合物起到增溶作用,另外形成的环糊精衍生物上含有磷酸酯基团,而细胞膜主要是由磷脂构成的富有弹性的半透性膜,磷脂双分子层是构成细胞膜的基本支架,该支架并不是静止的,具有一定的流动性,由于制备的环糊精衍生物中磷酸酯基团的存在,使得制备的环糊精衍生物分子与细胞膜的磷脂双分子层间具有较好的相容性,更利于细胞的吸收,另一方面,本发明制备的鼠用莪术醇饵剂中含有棉籽粉成分,棉籽粉中含有棉酚能杀死雄性鼠的或使变畸形,而莪术醇为雌性鼠的不孕剂,其作用机理具有抗早孕、抗着床功效,破坏子宫的蜕膜及绒毛膜组织并使之蜕变坏死,加强子宫收缩,最后导致流产和不孕。将莪术醇、棉籽粉二者成分叠加在一起,变为雌雄双向不孕剂,在抗生育中起到良好作用。

  [0088] 需要说明的是,在本文中,诸如第一和第二等之类的关系术语仅仅用来将一个实体或者操作与另一个实体或操作区分开来,而不一定要求或者暗示这些实体或操作之间有任何这种实际的关系或者顺序。而且,术语“包括”、“包含”或者其任何其他变体意在涵盖非排他性的包含,从而使得包括一系列要素的过程、方法、物品或者设备不仅包括那些要素,而且还包括没有明确列出的其他要素,或者是还包括为这种过程、方法、物品或者设备所固有的要素。

  [0089] 尽管已经示出和描述了本申请的实施例,对于本领域的普通技术人员而言,能够理解在不脱离本申请的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型,本申请的范围由所附权利要求及其等同物限定。